Primeiros dados moleculares sobre o complexo de espécies da lombriga humana Ascaris lumbricoides da Idade do Bronze e do Ferro em Hallstatt, Áustria

Scientific Reports volume 13, Artigo número: 12055 (2023) Citar este artigo

222 acessos

1 Altmétrico

Detalhes das métricas

Estudos paleoparasitológicos podem fornecer informações valiosas sobre o surgimento, distribuição e eliminação de parasitas durante um determinado período do passado. Nas minas de sal pré-históricas de Hallstatt, localizadas nos Alpes austríacos, as fezes humanas foram conservadas em sal. O objetivo deste estudo foi recuperar DNA antigo de parasitas intestinais desses coprólitos. Ao todo, 35 coprólitos das minas de sal de Hallstatt, que datam da fase de mineração da Idade do Bronze (1158-1063 aC) e da fase de mineração da Idade do Ferro (750-662 aC), respectivamente, foram analisados ​​por microscopia e métodos moleculares. Em 91% das amostras de coprólitos foram detectados ovos de helmintos transmitidos pelo solo (STH), nomeadamente de Trichuris e/ou Ascaris, por microscopia óptica. Os ovos de Ascaris estavam excepcionalmente bem preservados. Para análise posterior, o DNA foi extraído das amostras paleofecais e foram projetados primers específicos para espécies direcionados a diferentes genes. Embora a amplificação do DNA de Trichuris tenha permanecido sem sucesso, os dados de sequência do complexo de espécies de A. lumbricoides foram obtidos com sucesso de 16 coprólitos de três genes diferentes, o gene mitocondrial da subunidade 1 do citocromo c oxidase (cox1), o gene mitocondrial do citocromo B (cytB) e o gene mitocondrial Gene da subunidade 1 da NADH desidrogenase (nadh1). É importante ressaltar que estes incluíram duas sequências de Ascaris de um coprólito da Idade do Bronze, que até onde sabemos são os primeiros dados moleculares deste gênero deste período.

Hallstatt é uma pequena vila idilicamente situada em um lago de mesmo nome nos Alpes austríacos orientais e é um dos sítios arqueológicos mais importantes do Velho Mundo, sendo o local-tipo do início da Idade do Ferro europeia, o período Hallstatt. A região é Patrimônio Mundial da UNESCO e abriga uma das mais antigas minas de sal conhecidas no mundo. A mineração subterrânea de sal em grande escala é evidenciada aqui desde o século XIV. AC (Idade do Bronze). Apenas quatro minas de sal pré-históricas são conhecidas em todo o mundo – duas delas estão na Áustria, em Hallstatt e Dürrnberg, a terceira está em Chehrabad, no noroeste do Irão, e a quarta está em Duzdağı, no Azberbaijão1.

A paleoparasitologia é uma disciplina comparativamente jovem que permite a reconstrução da distribuição geográfica dos parasitas e dos seus hospedeiros ao longo do tempo, revelando assim dados sobre migrações de populações antigas, domesticação de animais, hábitos culturais, higiene, práticas médicas e outros aspectos da vida, como saneamento e gestão de resíduos2. O pioneiro da paleoparasitologia, Sir Marc Armand Ruffer, descobriu ovos calcificados do verme sanguíneo Schistosoma haematobium nos rins de duas múmias egípcias datadas de 1250 a 1100 aC3. Em 1944, Szidat relatou a detecção de ovos de Trichuris trichiura, o tricurídeo humano, e Ascaris lumbricoides., o verme redondo humano, em uma múmia de pântano do que era então a Prússia Oriental4 e em 1960, Callen e Cameron publicaram um método para reidratar alimentos dessecados. material antigo usando solução aquosa de fosfato trissódico a 0,5%5. Com este método tornou-se possível estudar também parasitas de materiais fecais antigos (coprólitos). Na Áustria, os primeiros estudos paleoparasitológicos foram realizados no início da década de 1970 em coprólitos das antigas minas de sal de Hallstatt e Dürrnberg, relatando a descoberta de ovos de T. trichiura e A. lumbricoides6.

O objetivo deste estudo foi recuperar DNA antigo de helmintos intestinais de coprólitos de diferentes períodos das antigas minas de sal de Hallstatt. Os grandes inventários orgânicos (por exemplo, ferramentas, materiais de trabalho) escavados nas áreas mineiras são bem investigados (tecnologia, análise de materiais)7, mas os dados moleculares ainda são escassos e abrem um grande potencial. Para o presente estudo, os coprólitos foram obtidos em condições estéreis de diferentes locais dentro das áreas de mineração correspondentes a diferentes períodos de tempo e comparados com material arquivado. Novos primers foram projetados para amplificar fragmentos curtos de três genes marcadores mitocondriais para identificação. Como o ADN antigo está normalmente disponível apenas em concentrações extremamente baixas8, os marcadores mitocondriais foram seleccionados como alvos de PCR, estando o ADN mitocondrial (mtDNA) presente num número de cópias muito mais elevado do que o ADN genómico.